期刊简介
本刊创办于1989年。原由中华人民共和国卫生部主管。西安医科大学主办。现由中华人民共和国教育部主管。西安交通大学主办。为国内外公开发行的皮肤性病学专业期刊。1996年由季刊改为双月刊。本刊主要报道我国现代医学及中医、中西医结合有关皮肤性病科学在预防、医疗、教学、科研等方面的研究成果。本刊始终遵循“理论与实践相结合，普及与提高相结合，注重科学性、实用性、创新性、注重中青皮肤科医师继续医学教育”的办刊方针。14年来在上级主管，主办单位领导的关怀下，在全体编委作者，读者及编辑部人员的共同努力下，已取得了一定的成绩和进步。在国内外具有一定的影响。许多地区和单位已将本刊列为晋升职称发表论文必须的期刊之一。
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首页>中国皮肤性病学杂志
- 杂志名称：中国皮肤性病学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：西安交通大学
- 国际刊号：1001-7089
- 国内刊号：61-1197/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 农业与生物科学研究中心文摘, 哥白尼索引(波兰), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
FLG基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定
李常兴；李雪梅；韩春雷；马泽粦；罗权；张锡宝
关键词：中间丝聚合蛋白, RNA干扰, 慢病毒, HaCaT细胞
摘要：目的 构建人类中间丝聚合蛋白(filaggrin,FLG)基因慢病毒载体及观察慢病毒表达载体介导的RNA干扰RNAi对人HaCat细胞FLG表达的影响.方法 应用基因工程技术筛选出3条针对FLG基因的RNAi靶序列,分别与GV115载体连接,构建3个重组慢病毒表达载体FLG-vshRNA 10154,FLG-vshRNA 10155,FLG-vshRNA 10156;将连接产物转化到DH5α感受态细胞,经PCR筛选阳性克隆、测序鉴定,将FLG-vshRNA,pHelper 1.0,pHelper 2.0共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,将包装产生的3种重组慢病毒分别感染HaCat细胞,实时定量PCR检测HaCat细胞FLG mRNA表达.根据筛选的结果,选取有效的载体进行病毒的大量包装.结果 慢病毒载体PCR和测序结果表明3对碱基成功插入到预计位点,序列完全一致.慢病毒载体感染HaCat细胞后,FLG基因mRNA的表达量与未感染慢病毒的细胞组及空载体感染组相比均明显下降,下降程度达70％以上(P＜0.05).3个慢病毒载体经包装产生的病毒滴度分别为1.2×109,1.5×109,1 ×109TU/mL.结论 成功构建针对FLG基因的3个慢病毒载体FLG-vshRNA,体外感染HaCat细胞后可有效抑制FLG基因的表达.
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